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山东绿都生物科技有限公司
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供应伏马毒素ELLISA试剂盒 |
伏马毒素(Fumonisin B1)ELISA检测试剂盒说明书
产品编号:LD018
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中伏马毒素B1的残留量。
二、适用范围
定量检测粮食、饲料等样本中伏马毒素B1残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 : 30min
试剂盒灵敏度: 0.1ppb(μg/kg)
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<0.5ppb;
* 试剂盒提供工作浓度标准品,使用更方便。
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度:
样本 检测下限 回收率
玉米 10ppb 70%-120%
饲料 10ppb 70%-120%
试剂盒特异性:
药物名称 交叉反应率(%)
伏马毒素B1 100%
玉米赤霉醇 <2%
四、所需材料
仪器:微孔板酶标仪450 nm/630 nm、均质器、振荡器、离心机、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:单道 1μL~10 μL、10 μL~100μL
多道 50μL~300μL
试剂:去离子水、甲醇
五、 试剂盒组成
组成部分 96T装量
1 伏马毒素B1酶标板 12×8孔
2 伏马毒素B1标准品*6 6×1 mL
3 伏马毒素B1高浓度标品1ppm 0.5mL
4 伏马毒素B1酶标物 13 mL
5 伏马毒素B1抗体 7mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×伏马毒素B1样品稀释液 45 mL
*注:6个标准品浓度为:0 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb,0. 9 ppb, 2.7ppb, 8.1 ppb,直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回 升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
加标准品/样品、抗体:加标准品/样品50μL
到对应的微孔中,加入伏马毒素B1酶标物50μL /孔, 再加入伏马毒素B1抗体50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20min。
洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,
加入洗涤工作液250μL/孔,每次静置20s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,*后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
显色:加入底物液A液50μL/孔,再加底物
液B液50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。
测定:加入终止液50μL/孔,用酶标仪立即 测定450nm处的吸光度值(建议用双波长450/630nm)检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标,以伏马毒素B1标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中伏马毒素B1实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2M硫酸,避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为10~15min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到20min,反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件: 2~8℃
保 质 期: 12个月 |
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