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山东绿都生物科技有限公司 
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| 供应四环素ELISA检测试剂盒 |
四环素ELISA检测试剂盒的检测时间45min,灵敏度0.1ppb。
四环素类（Tetracyclines）ELISA检测试剂盒说明书
产品编号：LD006
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中四环素类的残留量。
二、适用范围
定量检测动物组织、蜂蜜等样本中四环素类残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 ： 45min
试剂盒灵敏度： 0.1ppb(μg/kg)
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值＜1ppb；
* 样品处理方法更加简洁且无需氮吹；
* 试剂盒提供近工作浓度标准品，使用更方便。
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度：
样本 检测下限 回收率
鱼虾、鸡肉等 6ppb 70%-120%
蜂 蜜 3 ppb 70%-120%
试剂盒特异性：
药物名称 交叉反应率（%）
四环素 100%
土霉素 80%
金霉素 70%
四、所需材料
仪器：微孔板酶标仪450 nm/630 nm、均质器、振荡器、离心机、天平（感量0.01 g）、离心管（5 mL, 50 mL）
微量移液器：单道 1μL～10 μL、10 μL～100μL
多道 50μL～300μL
试剂：去离子水
五、 试剂盒组成
序号 组成部分 96T装量
1 四环素酶标板 12×8孔
2 50×四环素标准品*6 6×1 mL
3 四环素高浓度标准品1ppm 0.5mL
4 四环素类酶标物 13 mL
5 四环素类抗体 7mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×四环素类样品稀释液 45 mL
11 10×四环素类样品提取液 15mL
*注：6个50×标准品浓度为：0 ppb, 5 ppb,15 ppb, 45ppb, 135ppb, 405 ppb，稀释50倍使用，现配现用，配后避光放置并于半小时内使用，具体见溶液配制。
六、 酶标免疫测定程序
将所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回 升至室温（20～25℃）后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
加标准品/样品、抗体：加标准品/样品50μL
到对应的微孔中，加入四环素类酶标物50μL /孔， 再加入四环素类抗体50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min。
洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，
加入洗涤工作液250 μL/孔，每次静置20s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，*后一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
显色：加入底物液A液50 μL/孔，再加底物
液B液50 μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应15min。
测定：加入终止液50μL/孔，用酶标仪立即 测定450nm处的吸光度值（建议用双波长450/630nm）检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标，以四环素类标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中四环素类实际浓度。（详见试剂盒专业分析软件，以便进行大量样本的分析计算。）
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min，反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件： 2～8℃
保 质 期： 12个月 |
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