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山东绿都生物科技有限公司 
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| 氯霉素ELISA检测试剂盒 |
氯霉素ELISA检测试剂盒检测时间为50min,灵敏度达0.1ppb。
氯霉素（Chloramphenicol）ELISA检测试剂盒说明书
产品编号：LD005
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中氯霉素的残留量。
二、适用范围
定量检测动物组织、蜂蜜样品中氯霉素的残留。
三、试剂盒特点及技术指标
检 测 时 间 ： 50 min
试剂盒灵敏度： 0.1ppb(μg/kg)
试剂盒检测纯阴性样本的背景值＜0.1ppb
试剂盒检测样本的灵敏度和准确度：
样本 检测下限 回收率
蜂蜜 0.1 ppb 70 %-120 %
鸡肉、猪肉、虾、鱼 0.1ppb 70 %-120 %
试剂盒特异性：
药物名称 交叉反应率（%）
氯霉素 100 %
甲砜霉素 < 0.1 %
氟甲砜霉素 < 0.1 %
四、所需材料
仪器：微孔板酶标仪450 nm/630 nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装置、均质器、振荡器、离心机、
水浴锅、刻度移液管（10 mL）、天平（感量0.01 g）、离心管（5 mL, 50 mL）
微量移液器：单道 1μL～10 μL、10 μL～100 μL
多道 50 μL～300 μL
试剂：乙酸乙酯、正己烷、去离子水。
五、 试剂盒组成
序号 组成部分 96T装量
1 氯霉素酶标板 12×8孔
2 氯霉素标准品工作浓度*6 6×1 mL
3 氯霉素高浓度标准品100ppb 0.5 mL
4 氯霉素酶标物 13 mL
5 氯霉素抗体 7 mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×氯霉素样品稀释液 45 mL
*注：6个标准品浓度为：0 ppb, 0.1ppb, 0.3 ppb, 0.9 ppb, 2.7 ppb, 8.1ppb，直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
将所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回升至室温（20～25℃）后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
按标准品和样品双孔平行的数量使用微 孔。
加标准品/样品、抗体：加标准品/样品50 μL到对应的微孔中，再加入氯霉素抗体50 μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中孵育20 min。
洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，
加洗涤工作液250 μL/孔，每次静置20 s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，*后一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
加酶标物：加入氯霉素酶标物100 μL/孔，
轻轻振荡混匀，37℃避光环境中孵育20 min，甩干孔内液体，重复洗板3次，*后一次用吸水纸拍干。
显色：加入底物液A液50μL/孔，再加底物液B液50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中显色10min。
测定：加入终止液50 μL/孔，用酶标仪立即测定450 nm处的吸光度值（建议用双波长450/630 nm）检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标，以氯霉素标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中氯霉素实际浓度。（详见试剂盒专业分析软件，以便进行大量样本的分析计算。）
八、 注意事项
① 0标准的吸光度（450/630nm）值小于1.0（A450nm<1.0）时，可延长孵育时间5-10分钟，反之（A450nm>2.5），则缩短显色时间。
② 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
③ 反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。
④ 不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件： 2～8℃
保 质 期： 12个月 |
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