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山东绿都生物科技有限公司
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手 机:18266598399 |
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供应喹诺酮ELISA试剂盒 |
喹诺酮类试剂盒检测时间50min,灵敏度0.1ppb,样品处理方法简单,与仪器符合率高。
喹诺酮类(Quinolones)ELISA检测试剂盒说明书
产品编号:LD019
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中喹诺酮类的残留量。
二、适用范围
定量检测动物组织(肉类、水产)、蜂蜜样品中氟喹诺酮类药物的残留。
三、试剂盒特点及技术指标
* 检 测 时 间 : 50 min
试剂盒灵敏度: 0.1 ppb(μg/kg)
* 试剂盒检测纯阴性样本的背景值<0.3 ppb;
* 样本处理方法简单,结果符合率高
试剂盒检测样本的灵敏度:
序号 喹诺酮类药物 检测下限
1 环丙沙星(CIF) ≤2 ppb
2 恩诺沙星(ENR) ≤2 ppb
3 依诺沙星(ENO) ≤2 ppb
4 氧氟沙星(OFL) ≤2 ppb
5 诺氟沙星(NOR) ≤2 ppb
6 培氟沙星(PEF) ≤2 ppb
7 达氟沙星(DAN) ≤2 ppb
8 洛美沙星(LOM) ≤2 ppb
试剂盒样本准确度:
样本名称 回收率(%)
动物组织 70 %-120 %
蜂 蜜 70 %-120 %
四、所需材料
仪器:微孔板酶标仪450 nm/630 nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装置、均质器、振荡器、离心机、水浴锅、刻度移液管(10 mL)、天平(感量0.01 g)、离心管(5 mL, 50 mL)
微量移液器:单道 1 μL~10 μL、10 μL~100 μL
多道50 μL~300 μL
试剂:甲醇、去离子水。
五、 试剂盒组成
序号 组成部分 96T装量
1 喹诺酮酶标板 12×8孔
2 喹诺酮标准品工作浓度*6 6×1 mL
3 喹诺酮高浓度标准品1 ppm 0.5 mL
4 喹诺酮酶标物 13 mL
5 喹诺酮抗体 7mL
6 底物液A液 7 mL
7 底物液B液 7 mL
8 终 止 液 7 mL
9 10×浓缩洗涤液 40 mL
10 2×喹诺酮样品稀释液 45 mL
*注:6个标准品浓度为:0 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb,
0.9 ppb, 2.7 ppb, 8.1 ppb,直接使用。
六、 酶标免疫测定程序
将所需试剂从冷藏环境中取出,待其完全回 升至室温(20~25℃)后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。
加标准品/样品、抗体:加标准品/样品50 μL
到对应的微孔中,再加入喹诺酮抗体50 μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应20 min。
洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,
加入洗涤工作液250 μL/孔,每次静置20 s,甩去孔内液体,重复洗涤3次,*后一次用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
加酶标物:加入喹诺酮酶标物100 μL /孔,
轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光反应20 min,甩干孔内液体,重复洗板3次,*后一次用吸水纸拍干。
显色:加入底物液A液50 μL/孔,再加底物
液B液50 μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10 min。
测定:加入终止液50 μL/孔,用酶标仪立即 测定450 nm处的吸光度值(建议用双波长450/630 nm)检测。
七、 结果判定
以标准品百分吸光率为纵坐标,以喹诺酮标准品浓度(ppb)的半对数为横坐标,绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中,从标准曲线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中喹诺酮实际浓度。(详见试剂盒专业分析软件,以便进行大量样本的分析计算。)
八、 注意事项
① 洗板拍干后应立即进行下一步操作。
② 反应终止液为2 M硫酸,避免接触皮肤。
③ 不使用过了有效期的试剂盒,不交换使用不同批号的试剂。
④ 0标准的吸光度(450/630 nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为15~20 min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到30 min,反之则减短反应时间。
九、贮藏条件及保存期
贮藏条件: 2~8℃
保 质 期: 12个月 |
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